美女张开腿让男人桶|欧美浓毛老太乱码伦视频|狼友视频一区二区在线观看|久久久久久精品无码网站,日韩午夜,亚洲免费黄网,狠狠色综合网站久久久久…

— 新聞資訊 —

走進(jìn)Vazyme,了解更多關(guān)于諾唯贊的新聞和訊息

技術(shù)創(chuàng)新丨諾唯贊Dimer Free技術(shù)突破NGS行業(yè)難題


高通量測序文庫構(gòu)建時(shí),你是不是也常常碰到這種情況:文庫峰型圖中目標(biāo)文庫前面出現(xiàn)非特異性片段,呈尖刺狀,這就是二聚體,主要是由接頭或引物自連所形成。

南京諾唯贊生物科技股份有限公司

圖1. 含二聚體的文庫示意圖

二聚體的存在會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成較為嚴(yán)重的影響,一直是行業(yè)內(nèi)亟待解決的難題。

二聚體的存在會導(dǎo)致以下問題:

1. 操作體驗(yàn)繁瑣

在濕實(shí)驗(yàn)階段需要針對不同投入量調(diào)整接頭用量;

2. 影響數(shù)據(jù)質(zhì)量

干擾文庫真實(shí)產(chǎn)出的測定,導(dǎo)致有效下機(jī)數(shù)據(jù)量不足,數(shù)據(jù)質(zhì)量差,難以滿足后續(xù)分析需求;

3. 增加測序成本

嚴(yán)重時(shí)需加測數(shù)據(jù)量,造成時(shí)間和人力成本相應(yīng)增加。

我們深深理解面對以上問題時(shí)的痛苦,因此,諾唯贊研發(fā)團(tuán)隊(duì)堅(jiān)持不懈地研究,尋求創(chuàng)新的突破。經(jīng)過無數(shù)次的試驗(yàn)和改進(jìn),最終開發(fā)出了Dimer Free技術(shù)(簡稱:DF技術(shù)),能夠從根本上降低二聚體殘留,提升數(shù)據(jù)質(zhì)量,并統(tǒng)一接頭用量,優(yōu)化操作體驗(yàn)。為更準(zhǔn)確和更便捷的建庫實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。

 

Dimer Free技術(shù)原理介紹

DF- Dimer Sniper消除原理

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),T4 DNA連接酶不僅可以對接頭和模板進(jìn)行連接(TA連接),同時(shí)也能夠?qū)ζ渌黄ヅ涞膲A基進(jìn)行連接(接頭之間的TT連接)。在建庫過程中形成的小片段二聚體,就是由于這種非特異性連接形成的錯(cuò)配產(chǎn)物,見下圖2。

南京諾唯贊生物科技股份有限公司

圖2. T4 連接酶連接示意圖

針對這一堿基錯(cuò)配特征,諾唯贊研發(fā)團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了深入研究和多次試驗(yàn),最終從原核生物中發(fā)現(xiàn)了一種能夠識別堿基錯(cuò)配的限制性內(nèi)切酶,并以此為基礎(chǔ),通過蛋白質(zhì)功能改造平臺,運(yùn)用理性設(shè)計(jì)和定向進(jìn)化技術(shù),進(jìn)一步提升了該內(nèi)切酶的識別特異性和切割活性,最終成功研發(fā)出一款高效的內(nèi)切酶,命名為Dimer Sniper。該內(nèi)切酶能夠特異性地對T-T錯(cuò)配堿基進(jìn)行切割,從而有效地消除接頭二聚體。

南京諾唯贊生物科技股份有限公司

圖3. DF- Dimer Sniper消除原理

 

DF- Flowsizer篩選原理

除接頭二聚體之外,在文庫擴(kuò)增過程中也會形成引物二聚體,這些二聚體的長度比正常文庫偏小。基于這一特點(diǎn)以及對純化過程的深入理解,諾唯贊研發(fā)團(tuán)隊(duì)開發(fā)出一款專門去除小片段的洗脫試劑,命名為Flowsizer。其原理類似于分子篩,可以根據(jù)片段大小的差異進(jìn)行篩選,如下圖4所示。在文庫的回收過程中添加,可以特異性的對接頭和引物二聚體進(jìn)行去除,大幅提升目標(biāo)文庫比例。

南京諾唯贊生物科技股份有限公司

圖4. DF- Flowsizer篩選原理

測試數(shù)據(jù)展示

接頭二聚清除效果測試:

對含有不同比例接頭二聚體的文庫進(jìn)行測試,接頭二聚體的去除效率均高達(dá)80%以上(最高可至100%)。

南京諾唯贊生物科技股份有限公司

圖5. 接頭二聚體去除效果圖

 

引物二聚清除效果測試:

在多重?cái)U(kuò)增建庫中,文庫純化階段使用DF技術(shù)可以顯著降低引物二聚體的比例(高達(dá)90%以上),實(shí)現(xiàn)有效靶標(biāo)的高效富集,提升測序的有效數(shù)據(jù)產(chǎn)出和靶標(biāo)檢出率。

南京諾唯贊生物科技股份有限公司

圖6. 引物二聚體去除效果圖

 

統(tǒng)一稀釋倍數(shù),優(yōu)化操作流程

在以往的建庫實(shí)驗(yàn)中,針對核酸投入量的不同,需要對接頭進(jìn)行不同比例的稀釋,以減少二聚體的產(chǎn)生?,F(xiàn)在,得益于DF技術(shù)的成功研發(fā),可以真正做到“兼容”不同模板投入量,無需調(diào)整接頭稀釋比例,如圖7所示。在提升操作體驗(yàn)的同時(shí),也意味著在低模板投入量的場景下,可以通過增加接頭用量來進(jìn)一步提高文庫轉(zhuǎn)化率。

南京諾唯贊生物科技股份有限公司

圖7. 二聚體去除效果圖

諾唯贊將對多系列產(chǎn)品統(tǒng)一引入二聚體清除技術(shù),優(yōu)化操作體驗(yàn),全面改善測序結(jié)果,助力您的實(shí)驗(yàn)提質(zhì)增效,敬請期待!